【佑安学术】佑安人在国际会议上展示肝癌诊断新技术研究进展

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原标题:【佑安学术】佑安人在国际会议上展示肝癌诊断新技术研究进展

近日,北京佑安医院院长,北京市肝病研究所长李宁,研究员张爱英,受邀参加了2018年8月18日至19日在意大利佛罗伦萨举行的GAC-2018学术会议,世界知名专家学者和代表共同聚焦医学领域的基础研究,临床管理,重大疾病,过敏因素等各大学科的前沿研究,提供了一个交流最新研究成果和先进研究方法的平台,旨在整合资源,促进国际合作。来自美国,英国,俄罗斯,日本,以色列,哥伦比亚,中国以及台湾地区等世界各地的杰出学者与专家共同参与了此次盛会,交流领域内的新成果。张爱英研究员在大会上向国际同行做了题为“Study on Protein Microarray Diagnosis to Hepatocellular Carcinoma”的英文报告,受到国内外专家的一致好评。

张爱英研究员汇报的研究成果,专注于与肝癌诊断相关中的蛋白芯片技术研究,利用蛋白芯片技术检测肝癌相关血清蛋白标志物,以达到提高肝癌诊断的目的。该技术在北京佑安医院院长李宁教授的指导下,经过6年的实验室反复实验完成,发表文章20余篇,申请国际专利26项。获得了中国,日本,加拿大,澳大利亚,德国等多个国家的国际发明专利证书11项,具有国际国内领先水平。该芯片技术研究的系列成果也曾经在2018年4月23日~25日,在中国桂林召开的第7届春季国际工程与技术大会上做英文演讲报告(ID:SCET2018_10100),与国际同行进行技术交流讨论。


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特邀嘉宾和与会代表合影留念

目前,人类对肿瘤的认识水平和采用的常规治疗手段尚不能有效地治疗肝癌,因此,阐明肝癌发生发展的关键机制,建立肝癌预测预警和早期诊断技术方法,建立特异的靶向治疗和个体化治疗措施,对于临床上有效治疗肝癌、降低肝癌的死亡率、提高生存率和患者的生存质量有着十分重要的意义。肝癌的早期诊断与肝癌的治疗及预后密切相关,肝癌相关血清蛋白肿瘤标志物可以客观地、特异性地反映肝癌的发生和发展进程,其精准和高灵敏的定量检测对于临床诊断、治疗过程和预后评价具有重要意义。

血清标志物检测是目前能够进行肝癌早期诊断的可行性方法,然而,现有肝癌血清学诊断标志物在极早期肝癌患者诊断和预警方面的特异性、敏感性仍然存在不足,患者早期漏诊率较高。针对肝癌诊断过程中,样品复杂、单一标志物可信度差、特异性标志物匮乏、丰度低等问题,李宁教授团队开发的蛋白芯片检测方法研究,揭示了血清蛋白标志物在肝癌发生发展进程中的分子机制,实现了肝癌的精准诊断,提高肝癌的早期诊断,促进生物医学研究领域的发展。


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首都医科大学附属北京佑安医院,北京市肝病研究所于2012年成立了生物芯片实验室,目前已经成功研发了单标志物蛋白芯片和多标志物蛋白芯片,多标志物芯片可用来检测甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)、高尔基体糖蛋白73(GP73)和异常脱羧凝血酶原(DCP)等5项肝癌相关血清标志物。蛋白芯片用于检测血清中的肿瘤标志物,其敏感性与特异性与传统的ELISA方法相比较,没有统计学差异;在样本量,时间和成本上,蛋白芯片有明显的优势。完成一项标志物检测, ELISA 方法大约需要150元人民币,检测时间3个小时,需要样本量50微升。蛋白芯片方法具有多同量的有点,可以一次性完成多项标志物检测,目前研发的肝癌血清标志物蛋白芯片,一次完成5项标志物检测,需要50元人民币,检测时间1.5个小时,需要样本量15微升。快速,经济,微量样本量的芯片技术,有利于对肝癌高危患者进行大规模筛查。


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北京佑安医院,北京市肝病研究所研发的肝癌相关标志物蛋白芯片

肝癌血清样本资源库是进行肝癌血清学诊断标志物研究的关键。为了尽快实现肝癌的极早期防控、寻找肝癌极早期防控和动态检测的标志物,提高肝癌的精准诊断,李宁教授于2006年发起成立了《北京市乙型肝炎大数据样本资源库》。现有-80℃冰箱70台,大型液氮罐7套,现有标本(包括血清、血浆、 PBMCs、DNA、RNA)HBV标本40万余份;HCC标本10万余份。总体样本数超过50万份,并附有全部临床信息。并建立了慢乙肝-肝硬化-肝癌全病程动态随访队列。慢乙肝1000余例;肝纤维化、肝硬化1000余例;肝癌800余例。动态随 访队列共3000余例,所有患者每3个月随访一次,包括临床症候学、检验学、影像学和病理学资料,预留外周血标本。前期工作完成了2000人份的检测, 获得了5项标志物在肝癌各个临床分期的变化规律,采用Fisher判别方法方法,对5项标志物在肝癌各个临床分期的表达数值,进行分析,建立了肝癌精准诊断数学模型,肝癌/正常人对比确诊率达95.2%;早期肝癌/肝硬化对比诊断符合率达71.6%。

在这次大会汇报中,张爱英研究员重点汇报了AFP-L3蛋白芯片的研发过程。AFP-L3是AFP的异质体,根据与小扁豆凝集素( LCA)亲合强弱程度不同,将 AFP分为AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3。近年来研究发现AFP-L3在肝癌的早期诊断、鉴别诊断、疗效评估和预后监测等方面均比AFP检测更具优势。在2005年被美国食品及药物管理局(FDA)采纳作为肝癌患者的诊断和预后指标。目前血清糖蛋白AFPL3的检测方法原理,是根据糖蛋白与凝集素的亲和程度进行分离或者糖蛋白富集,然后用免疫学方法进行定量检测,或者使用抗体直接进行免疫学检测检测方法技术要求高、操作繁琐、试剂昂贵,限制了其在临床的应用。研究团队经过反复摸索实践,利用传统糖蛋白检测方法的原理,成功简单、快速的蛋白芯片检测AFPL3方法,该技术已经成功获得了多项国际专利。该方法能够定性、定量检测样本中的AFPL3,方法简便,操作简单,成本低廉,将为肝癌高危人群大规模筛查提供了经济、可靠的检测方法,并将提高肝癌的诊断准确率,进一步为提高肝癌治愈率和长期生存率做出重大贡献。


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张爱英向国际同行汇报的肝癌相关标志物蛋白芯片检测技术,具有简单、快速、便捷、经济、高通量的优点,属于简单、快速便于普及的快速诊断技术,该技术应用于大规模肝癌筛查中,患者既可避免活检创伤和放射性辐射,同时能够节约大量宝贵的医疗资源。全世界每年的新发肝癌病人数高达 70 万例左右,而我国将近占了一半左右的比例。该项目的实施,可带来可观的经济效益,具有重要的社会和经济学意义。


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国内和国际专利证书

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